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微生物培养基的用途及组成成分

发布日期:2024/09/04


一、根据用途不同,微生物培养基可以大致分为以下几类:

1、基础培养基:含有细菌基础生长所需的基本营养成分,最常用的是肉浸液,俗称肉汤,主要含生肉浸液和蛋白胨,用于细菌的增菌、检验,也是制备其他培养基的基础成分。 

2、营养培养基:基础培养基中加入血液、 葡萄糖、生长因子等特殊成分,供营养要求高的细菌和需要特殊生长因子的细菌生长,最常用的是血琼脂平板和巧克力血平板等。

3、鉴别培养基:在某些培养基中加入一些特定物质, 如糖、苷、醇类、氨基酸、蛋白质等和指示剂,测定细菌的生化反应,以鉴别和鉴定细菌用的培养基。例如糖发酵管、克氏双糖铁琼脂(KIA)、伊红-亚甲蓝琼脂和动力-吲哚-尿素(MIU) 培养基等。

4、选择培养基:在培养基中加入抑制剂,抑制标本中杂菌生长,有助于所选择的细菌种类的生长。如培养肠道致病菌的沙门-志贺琼脂。

5、特殊培养基:某些细菌在生长繁殖时需要特殊的条件才能够生长,包括厌氧培养基和细菌L型培养基等。前者是培养专性厌氧菌的培养基,后者是针对细胞壁缺损的细菌L型。


二、微生物培养基的组成成分主要包括以下几类:

(1)营养物质


不同的细菌对营养的要求不同,但细菌需要的营养物质应含有氨源、碳源、无机盐类和生长因子等。

1、碳源:最常用的碳源是葡萄糖,它提供能量和碳元素用于细胞的代谢和生长。除了葡萄糖,还可以使用其他碳源,如乳糖、果糖等。

2、氮源:氮源是细胞合成蛋白质和核酸所必需的。常见的氮源包括氨基酸、蛋白胨、酵母提取物、尿素等。

3、矿物质和无机盐:提供细菌生长的各种元素,如钾、钠、铁、镁、钙、磷、硫等。最常用的有氯化钠和磷酸盐,前者维持酶的活性、调节菌体内外的渗透压,后者是细菌良好的磷源,并具有缓冲作用。

4、维生素:维生素是细胞合成酶的辅因子,对细胞生长和代谢过程至关重要。常见的维生素包括维生素B群、维生素C、维生素E等。

5、氨基酸:氨基酸是蛋白质合成的组成单元,对于细胞的生长和功能非常重要。培养基中通常包含一部分或全部必需氨基酸,而非必需氨基酸通常不需要额外添加。

6、生长因子和激素:生长因子和激素可以促进细胞的增殖和分化。不同类型的细胞需要特定的生长因子和激素来实现最佳生长条件。


(2)凝固物质


制备固体培养基时,需在液体中加入凝固物质。常用凝固物质为琼脂,某些情况下也可用明胶、卵白蛋白、血清等。琼脂是从石花菜中提取出来的一种半乳糖胶,温度在98℃以上时可溶于水,在45℃以下可凝固成凝胶状态,不被细菌分解利用,无营养作用。

 

(3)抑制剂和指示剂


制备培养基时常加入抑制剂和指示剂,不是细菌生长繁殖所必需的物质,而是选择、鉴定及判断结果的需要。

1、抑制剂:具有选择抑制作用,在制备培养基 时加入定种类的抑制剂, 可抑制非检出菌(非病原菌)的生长,利于检出菌(病原菌)的生长,常用有胆盐,煌绿、亚硫酸钠、亚硒酸钠及-些染料和某些抗生素等。

2、指示剂:在培养基中加入一定种类的指示剂, 观察细菌是否利用和分解培养基中的糖、醇类。常用的有粉红、甲基红、中性红、溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝和中国蓝等酸碱指示剂。亚甲蓝常用作氧化还原指示剂。

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